%0 Journal Article %T 哈尔滨产乙醇杆菌属AFLP反应体系的建立与优化 %A 郑国香 %A 陈忠林 %A 郑文玲 %A 关正军 %A 吴忆宁 %A 任南琪 %J 哈尔滨工业大学学报 %D 2011 %R 10.11918/j.issn.0367-6234.2011.06.005 %X 为建立和优化适合于哈尔滨产乙醇杆菌属基因组AFLP分析的技术体系,以哈尔滨产乙醇杆菌属Ethanoligenensharbinense为研究材料,对AFLP反应体系的几个关键参数进行探讨和优化.结果表明,20μL反应体系中,用于酶切的基因组DNA的纯度(OD260/OD280)和质量分别为1.8~1.9和50~100ng之间为宜;限制性内切酶(EcoRI/MseI)组合的最佳酶切用量和酶切时间分别为EcoRI(2.0μL)/MseI(0.7μL)和3h;琼脂糖凝胶电泳图谱对比显示,利用EcoRI-A/MseI-G、EcoRI-G/MseI-A、EcoRI-G/MseI-C、EcoRI-T/MseI-A、EcoRI-T/MseI-C、EcoRI-T/MseI-G和EcoRI-T/MseI-T7个选择性扩增引物组合选扩出的条带稳定、清晰、无背景干扰,能够很好地反映哈尔滨产乙醇发酵细菌间DNA指纹图谱的多态性分布,为构建发酵产氢细菌AFLP图谱和种间遗传多样性奠定基础. %K AFLP %K 产氢发酵细菌 %K 优化 %K 多态性 %U http://journal.hit.edu.cn/hitxb_cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110605&flag=1