%0 Journal Article
%T 海洋球石藻Emiliania huxleyi(Prymnesiophyceae)病毒主要外壳蛋白基因的克隆与序列分析
%A 张稚兰
%A 刘静雯
%A 董双林
%A 苏国成
%A 张彦锋
%J 海洋与湖沼
%D 2009
%R 10.11693/hyhz200902007007
%X 在实验室纯培养条件下, 用过滤的海洋球石藻特异性病毒(Emiliania huxleyi virus, EhV)EhV-99B1 株感染球石藻(E. huxleyi, Eh), 建立病毒与宿主之间稳定的感染体系, 病毒裂解滤液经卷式切向流超滤和PEG 8000 浓缩、CsCl 密度梯度离心, 获得足量高纯度的病毒颗粒。根据已报道的其它EhV 株系主要外壳蛋白(MCP)基因内保守片段设计合成一对特异引物, 从EhV-99B1 病毒基因组中克隆到了长度约为 300bp 的病毒外壳蛋白基因保守片段。该片段与pBS-T 载体连接后转化Escherichia coli DH5α, 对筛选到的阳性克隆进行序列测定与分析。结果表明, 该克隆片段与GenBank 中EhV163(AF453851)分离株的同源性最高, 该区域内的核苷酸与对应推导的氨基酸序列同源性均为100%, 证实获得的DNA 片段是EhV-99B1 的外壳蛋白基因; 与EhV203(AF453855)分离株的核苷酸及氨基酸序列的同源性较低, 分别为93%和100%。表明该病毒在自然海域中分布广泛并具有一定的多态性, 同时在进化上也存在相当的复杂性。因此, MCP 基因可以作为一种新的分子遗传标记以区分自然群落中EhV 的不同基因型, 对于理解海洋球石藻类病毒与宿主之间复杂的相互作用关系将是一个十分有价值的工具。
%K 海洋球石藻病毒(EhV)
%K 病毒主要外壳蛋白(MCP)
%K 基因克隆与序列分析
%U http://www.marinejournal.cn/hyyhz/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=200902007&flag=1