%0 Journal Article
%T 高效转染HepG2细胞的逆转录病毒载体系统的构建及应用
%A 董海燕
%A 陈剑锋
%A 邵敬伟
%A 王涛
%J 福州大学学报(自然科学版)
%D 2007
%X 为构建含绿色荧光蛋白(EGFP)和人胰岛素原基因的逆转录病毒表达载体,并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达,将IRES-EGFP片段克隆到含调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体(pLXSN-GI-Ins)中,构建得到表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.经脂质体介导转染HepG2细胞后,各孔分别加入含有30.0 mmol/L葡萄糖的培养液继续培养24 h,在荧光显微镜下观察EGFP基因的表达,检测细胞上清液中的胰岛素值.数据显示,成功构建逆转录病毒表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.转染HepG2细胞后48 h,表达EGFP基因的细胞数目占总细胞数目的比值为(38.0±5.0)%.结果表明,构建了含EGFP和调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体,并且能够在HepG2细胞中成功表达.
%K 绿色荧光蛋白
%K 胰岛素
%K 逆转录病毒载体
%K HepG2细胞
%U http://xbzrb.fzu.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=200706200&flag=1