%0 Journal Article
%T hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征
%A 陈春
%A 陈躬瑞
%A 刘树滔
%A 卢菀华
%A 饶平凡
%J 福州大学学报(自然科学版)
%D 2004
%X 为获得hCuZn-SOD基因,根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列,设计扩增引物,用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SODcDNA序列,并将它插入pUCm-T载体中,经过DNA序列测定证实,该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比),引起其编码第116个氨基酸由G变为D.采用定向克隆的方法将hCu Zn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上,构建表达质粒pGEX-SOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析证实,经IPTG诱导,融合蛋白GST-SOD获得高效表达.破碎菌体、上清经谷胱甘肽亲和层析初步纯化后,得到纯度达90%的目的蛋白.活性实验表明,GST-SOD具有生物活性.
%K 人铜/锌超氧化物歧化酶
%K 克隆
%K RT-PCR
%K 表达
%K 融合蛋白
%K 亲和层析
%U http://xbzrb.fzu.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=200406180&flag=1