%0 Journal Article
%T 扁豆几丁质酶基因的克隆及表达
%A 陈增
%A 叶秀云
%A 李仁宽
%A 冯爱华
%A 林娟
%A 杨捷
%J 福州大学学报(自然科学版)
%D 2012
%X 以扁豆总RNA为模板,通过RT-PCR技术扩增到长度为885 bp的扁豆几丁质酶基因cDNA,其编码294个氨基酸,目的蛋白的分子量为28.429 kDa.以该基因构建pET-21a-chi表达载体并在E.coli BL21(DE3)中表达.30℃下,用0.1 mmol.L-1IPTG,诱导5 h,表达产物的酶活力为36.25 U.mL-1.通过常压Sephadex G-50凝胶过滤色谱,DEAE-650C常压与高效离子交换色谱对表达产物进行纯化.目标蛋白达到电泳纯(SDS电泳一条带),几丁质酶的比活力108.42 U.mg-1.表达的蛋白质产物主要以可溶性形式存在.
%K 扁豆
%K 几丁质酶基因
%K 克隆
%K 表达
%K 纯化
%U http://xbzrb.fzu.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120499&flag=1