%0 Journal Article
%T 农杆菌介导转化大丽轮枝菌的体系优化
%A 陈天子
%A 袁洪波
%A 杨郁文
%A 刘蔼民
%A 张保龙
%J 棉花学报
%P 507-514
%D 2011
%R 1002-7807（2011）06-0507-08
%X 为了揭示大丽轮枝菌的遗传变异和致病机理，以含潮霉素为抗性筛选标记、绿色荧光蛋白GFP为报告基因载体，优化了农杆菌介导转化大丽轮枝菌的遗传转化体系，获得了大丽轮枝菌菌株V991和BP2含绿色荧光蛋白GFP的转化子，转化率达到100×10-6～550×10-6。优化的转化条件为农杆菌以IM液体培养基调节浓度至OD600=0.2并预培养4h，然后与等体积的浓度为106个·mL-1的大丽轮枝菌孢子混匀，每皿取200μL混合液涂于固体IM共培养基的纤维素膜上，25℃共培养60h，转移至固体PDA培养基上以头孢噻肟钠500mg·L-1+潮霉素B50mg·L-1进行筛选。研究发现农杆菌LBA4404和AGL-1比农杆菌SK1044和EHA105更适用于大丽轮枝菌转化。对转化子观察和鉴定发现从表型上，70.8%转化子保持野生型形态，29.2%转化子发生了形态变化；从致病力上，81%转化子的致病力相对于野生型没有发生显著变化，19%转化子的致病力或增强或减弱。
%K 农杆菌
%K 大丽轮枝菌
%K 潮霉素
%K GFP
%K 遗传转化
%K 遗传稳定性
%K 表型变异
%U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2011/V23/I6/507