%0 Journal Article %T 亚洲棉7号染色体分离及文库构建 %A 彭仁海 %A 刘玉玲 %A 刘 方 %A 王春英 %A 黎绍惠 %A 张香娣 %A 王玉红 %A 王坤波 %J 棉花学报 %P 379-385 %D 2012 %R 1002-7807(2012)05-0379-07 %X 采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法,建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术。单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后,产物以Southern杂交、简单重复序列(Simplesequencerepeats,SSR)引物扩增和荧光原位杂交技术(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)进行验证,构建了棉花单条染色体文库。克隆片段长度在150~1000bp,平均为550bp;文库包含1.38×105个克隆,覆盖染色体长度1倍左右,空载率为1%,滴度为1.3×106pfu·mL-1,单一拷贝和低拷贝比例达到59%以上,为该条染色体分子标记的筛选、重要基因克隆和定位、遗传图谱的饱和奠定基础。 %K 亚洲棉 %K 显微切割 %K 微克隆 %U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2012/V24/I5/379