%0 Journal Article %T 双抗夹心酶免疫法检测转Bt基因抗虫棉种子的研究 %A 孙硕 %A 张坤 %A 谭桂玉 %A 曹振 %A 南铁贵 %A 王保民 %J 棉花学报 %P 45-50 %D 2013 %R 1002-7807(2013)01-0045-06 %X 应用中国农业大学化控中心筛选的抗BtCry1Ac蛋白鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了BtCry1Ac蛋白的双抗夹心酶联免疫检测法(SandwichELISA)。该方法的检测范围为0.78~50.0ng·g-1,线性回归方程y=0.6634x-1.7387,决定系数为0.992。该方法与国外商业化试剂盒检测结果完全一致,可用于转基因抗虫棉Bt毒蛋白定性和定量检测。采用所建立的方法对亲本之一为非转基因抗虫棉的杂交F1、F2种子进行检测,结果F1全部为阳性,F2阴性和阳性数量比为1∶3,符合性状分离定律;此外,模拟检测种子的偶然基因改造成分混杂(AdventitiousPresence,AP)检测结果为对于Bt毒蛋白含量在140ng以上的单粒种子,最低检测比例为1∶110。 %K 转Bt抗虫棉 %K 双抗夹心酶免疫法 %K 种子纯度 %K 偶然基因改造成分混杂 %U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2013/V25/I1/45