%0 Journal Article %T 荧光标记基因转化棉花黄萎病菌及标记菌系选育 %A 王晓楠 %A 齐宏 %A 张金凤 %A 光杨其 %A 唐灿明 %J 棉花学报 %P 221-227 %D 2014 %R 1002-7807(2014)03-0221-07 %X 为了研究黄萎病菌的侵染机制,通过农杆菌介导的转化方法,将绿色荧光蛋白基因sGFP导入落叶型黄萎病菌VD07038,将红色荧光蛋白基因mCherryRFP导入非落叶型黄萎病菌Bp2中,分别获得了具有绿色、红色荧光信号的阳性转化子。经过分子验证和连续继代培养,证明了这些转化子具有遗传稳定的对潮霉素的抗性。通过对转化子的菌落形态、生长速度和致病力进行检测,发现大部分转化子与野生型基本一致,少量转化子发生变异,其中转化子Bp2R-30不能产生微菌核,致病力显著下降。利用荧光显微镜观察了转化子VD07038G-10在感病棉花品种苏棉22幼苗根部的侵染情况。结果表明,在接菌12h后VD07038G-10的孢子可吸附在根表面;接种7~9d后,菌丝入侵到棉花根部的维管组织。本研究获得的荧光蛋白标记的棉花黄萎病菌VD07038G-10可用于实时观测黄萎病菌侵染棉花根系的过程,并且可以定量鉴定不同棉花品种对该菌系的抗性,为棉花黄萎病菌抗性鉴定提供一种新方法。 %K 棉花 %K 大丽轮枝菌 %K 绿色荧光蛋白 %K 红色荧光蛋白 %K 转化 %U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2014/V26/I3/221