%0 Journal Article
%T 海岛棉纤维发育相关基因GbPDF2酵母单杂交文库构建及其上游基因解析
%A 郑云娜
%A 代华琴
%A 曹跃芬
%A 李金娟
%A 戎均康
%A 丁明全
%J 棉花学报
%P 204-212
%D 2014
%R 1002-7807（2014）03-0204-09
%X 为研究棉纤维起始发育的分子调控网络，以海岛棉(GossypiumbarbadenceL.)品种“海渝”开花当天(0DPA)胚珠为实验材料，利用酵母单杂交技术来筛选棉纤维起始发育相关基因GbPDF2的上游调控转录因子。首先，克隆GbPDF2的启动子(AccessionKJ475468)；构建了该启动子的诱饵融合载体(GbPDF2-PRO)-pAbAi，转入酵母细胞中重组为Y1HGold[Bait-pAbAi]菌株。之后，应用MatchmakerGoldYeastOne-HybridLibraryScreeningSystem系统构建酵母单杂交cDNA文库，转化重组酵母菌株，通过同源重组筛选GbPDF2的上游转录调节因子。构建的cDNA文库库容为2.23×106，重组率为95.8%，插入片段大小为300bp～2000bp，其中大于1000bp的阳性克隆为109个。cDNA插入片段经测序和Blast同源性分析，筛选出2个生长素响应因子，1个WRKY7转录因子，1个WD-repeatprotein40等与纤维发育相关的转录调节因子，为研究棉纤维起始发育的信号转导通路奠定了基础。
%K 棉花纤维
%K 基因功能
%K 酵母单杂交
%K SMART技术
%K cDNA文库
%U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2014/V26/I3/204