%0 Journal Article
%T 棉花GhEPSPS基因的原核表达载体的构建及诱导表达
%A 巩元勇
%A 倪万潮
%A 帕尔哈提·买买提
%A 郭书巧
%A 束红梅
%A 何林池
%J 棉花学报
%P 563-568
%D 2014
%R 1002-7807(2014)06-0563-06
%X 目的在于构建棉花GhEPSPS基因的原核表达载体，并在宿主大肠杆菌中成功诱导表达。利用RT-PCR技术从陆地棉苏棉18中克隆获得GhEPSPS基因的开放阅读框序列，连接到pEASY-Blunt平端载体，构建获得重组载体pEASY-Blunt-GhEPSPS；以该重组载体为模板，PCR获得两端含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的GhEPSPS基因CDS序列，通过这2个酶切位点插入到pET32a载体，构建获得原核表达重组载体pET32a-GhEPSPS，转化到宿主菌株BL21（DE3）中，经IPTG诱导后，SDS-PAGE检测目的基因的表达情况。研究结果表明，成功克隆获得了棉花GhEPSPS基因的CDS序列，并成功构建了该基因的原核表达载体，目的基因能够在宿主菌中被诱导大量表达。该研究结果将为深入研究棉花EPSPS酶的结构、功能以及酶学特性提供重要的研究基础。
%K 棉花
%K GhEPSPS基因
%K 原核表达
%K SDS-PAGE
%U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2014/V26/I6/563