%0 Journal Article %T 棉花GhSKIP35基因的克隆与表达分析 %A 刘凯 %A 张华崇 %A 齐放军 %A 张文蔚 %A 简桂良 %J 棉花学报 %P 111-117 %D 2015 %R 10.11963/issn.1002-7807.201502003 %X 以中植棉KV1SSH文库为基础,从陆地棉中植棉KV1中克隆出来泛素途径SKIP35基因,命名为GhSKIP35。该基因的开放阅读框全长为1863个核苷酸,编码620个氨基酸,含有1个ANK保守结构域。进化分析表明,GhSKIP35蛋白与甜橙(Citrussinensis)的SKIP35蛋白相似性最高。qRT-PCR分析显示在接种大丽轮枝菌V991菌系后初期GhSKIP35基因表达量激增,12h便可达到顶峰,24~48h逐渐下降,推测它在陆地棉抗黄萎病早期防卫反应中起重要作用。利用VIGS(Virusinducedgenesilencing)技术,在中植棉KV1中成功地沉默GhSKIP35基因;对沉默棉株接种大丽轮枝菌V991鉴定显示,其病情指数为50.75,而野生型的中植棉KV1和转化空载体棉株的病情指数分别为9.38和11.54。GhSKIP35基因沉默后,中植棉KV1对黄萎病的抗性丧失,表明GhSKIP35基因在陆地棉抗黄萎病的过程中起重要作用。 %K 棉花 %K 大丽轮枝菌 %K SKIP35 %K qRT-PCR %K VIGS %U http://journal.cricaas.com.cn:8083/Jweb_mhxb/CN/Y2015/V27/I2/111