%0 Journal Article %T 普通小麦7B染色体的显微分离和低拷贝专化DNA序列的克隆 %A 刘宝 %A 戎均康 %A 董英山 %A 韩方普 %A 刘振兰 %A 何孟元 %A 黄百渠 %A 郝水 %J 科学通报 %P 389-393 %D 1999 %X 以普通小麦“中国春”7B单体的花粉母细胞为材料,显微分离出7B染色体.经蛋白酶K和DNA拓扑异构酶Ⅰ处理后进行1~3轮DOPPCR扩增,产生了150~700bp的连续DNA片段.基因组Southern杂交证实扩增的DNA源自小麦基因组.将大于200bp的第3轮PCR扩增产物(50μL)克隆后,可产生20000个重组克隆.对随机选取的50个克隆分析表明,其中21个克隆产生了大小为240~600bp的清晰PCR产物.点杂交结果表明,21个克隆中11个(~55%)为低拷贝序列,10个(~45%)为重复序列.对“中国春”全套“缺体四体”基因组DNA的Southern杂交结果表明,产生清晰杂交谱带的6个低拷贝克隆均为7B染色体专化或第7部分同源群专化序列;而随机选取的3个重复序列则为没有专化性的弥散型重复序列. %K 小麦 %K 染色体显微分离 %K DOP-PCR %K 专化DNA序列 %U http://csb.scichina.com:8080/CN/abstract/abstract366583.shtml