%0 Journal Article
%T 强MAR的分离及其体内外功能鉴定
%A 张可伟
%A 王健美
%A 杨国栋
%A 郭兴启
%A 温孚江
%A 崔德才
%A 郑成超
%J 科学通报
%P 1572-1577
%D 2002
%X 将MAR(matrixattachmentregion)构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默.用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列(TM2,TM3,AM1和AM2),以水稻悬浮细胞为材料,提取大量细胞核制备核基质,以已发表的MAR(TM1)为对照,对4个新MARs序列进行体外结合实验.结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列.将4个新MARs和对照分别顺向构建到表达载体pBI121gus基因表达盒两侧,用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因植株.对转基因植株体内GUS酶活性检测表明,TM1,TM2,TM3和AM1均能使外源基因表达增强,其中TM2增强5倍,TM1增强1.5倍,TM2增强效果强于对照TM1.表明分离到一个新的强MAR,可以用于高效表达载体的构建.对5个MARs的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析,并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论.
%K MAR分离
%K 核基质
%K 体外结合
%K β-葡糖醛酸酶
%K 外源基因表达
%K 高效表达载体构建
%U http://csb.scichina.com:8080/CN/abstract/abstract368014.shtml