%0 Journal Article
%T 水稻全生育期均一化cDNA文库的构建和鉴定
%A 储昭晖
%A 彭开蔓
%A 张利达
%A 周斌
%A 魏君
%A 王石平
%J 科学通报
%P 1656-1662
%D 2002
%X 以优良杂交水稻的恢复系明恢63为材料,构建覆盖水稻基因组的cDNA文库,用于功能基因组的研究.选择水稻全生育期过程中的9个时期的不同组织和病原诱导的组织分别构建了15个定向cDNA文库.依据基因组DNA饱和杂交的原理,将从15个独立的cDNA文库中提取的质粒混合,并与固定在磁珠上具有互补性的2份基因组DNA亲和体系饱和杂交,收集杂交组分中的质粒并重新转化大肠杆菌,获得全生育期均一化cDNA文库.该文库平均插入片段1.4kb,含62000个克隆子.反向Northern杂交显示,该文库收集了众多表达丰度极低的基因以及特异表达的基因.对文库中随机的10750个克隆进行了测序,序列分析比较后获得6399条非重复的EST(expressedsequencetag)序列,非重复序列占59.5%.目前,用该文库制作的cDNA芯片已被用于功能基因组的研究.
%K 水稻
%K 均一化
%K cDNA文库
%K 测序
%K DNA芯片
%K 全生育期
%U http://csb.scichina.com:8080/CN/abstract/abstract368033.shtml