%0 Journal Article
%T 玉米C4型pepc基因的分子克隆及其在小麦的转基因研究
%A 陈绪清
%A 张晓东
%A 梁荣奇
%A 张立全
%A 杨凤萍
%A 曹鸣庆
%J 科学通报
%P 1976-1982
%D 2004
%X 通过LA-PCR方法，从当地玉米材料中获得了完整的玉米C4型pepc基因。测序结果与GenBank中登录的玉米C4型pepc基因序列进行比对分析表明，DNA序列的同源性达98.96%，mRNA同源性达99.38%，蛋白质的氨基酸序列同源性达99.38%，在DNA水平，两者之间有49处碱基差异，18处发生在内含子区，18处发生在外显子处。在mRNA水平，两者之间有15处差异，但是这些差异在蛋白质水平上仅导致了4个非连续排列的氨基酸差异。构建了该基因的农杆菌二元表达载体pBAC214。通过PDS/1000He基因枪转化法，获得了该基因的转基因小麦。对转基因小麦进行的Southern杂交，结果表明来自玉米的鉴定pepc基因完全整合到了小麦基因组中。通过对转基因小麦叶片的可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析，表明该基因在小麦中获得了正确的转录、剪接和翻译。通过对转基因小麦叶片中PEPC酶活性的初步测定，发现部分转基因植株叶片中PEPC酶活性提高了3-5倍，与玉米叶片中的PEPC活性相当。对转基因小麦旗叶光和生理指标的测定，发现部分转基因植株光合速率有所提高，并且气孔的开放程度与叶片中的PEPC活性紧密相关。说明完整的玉米C4型pepc基因在小麦中可以正确表达和起到一定的生理作用。
%K C4途径
%K pepc基因
%K 转基因
%K 小麦
%U http://csb.scichina.com:8080/CN/abstract/abstract369005.shtml