%0 Journal Article %T 烟夜蛾精氨酸激酶基因的克隆及mRNA表达分析 %A ?张元臣 %A 安世恒 %A 李为争 %A 郭线茹 %A 罗梅浩 %A 原国辉 %J 昆虫学报 %P 754-761 %D 2011 %X 为了深入了解精氨酸激酶基因的作用和寻求害虫防治新的分子靶标,本研究采用RT-PCR和RACE技术,从烟夜蛾Helicoverpaassulta脂肪体中克隆了精氨酸激酶cDNA序列,命名为HassAK(GenBank登录号:HQ336337),并采用荧光定量PCR测定了HassAK基因在不同发育阶段(4龄幼虫第1天到化蛹第1天)、不同组织(头部、中肠、脂肪体、体壁和腹足)和不同温度条件下的表达情况。测序和序列分析结果表明,HassAK基因阅读框架全长1068bp,编码355个氨基酸残基,预测蛋白质分子量和等电点分别为40.0kD和5.76。氨基酸序列分析表明,该序列具有精氨酸激酶典型的酶活性部位、酶活性中心位点和能形成离子偶结构的保守区。序列比对结果表明,HassAK与其他昆虫AK的氨基酸序列具有70%以上的一致性。荧光定量分析结果显示,HassAK基因在幼虫头部、中肠、脂肪体、体壁和腹足均可表达,其中以腹足和中肠内的表达水平较高。时序表达分析表明,预蛹期HassAK基因的表达量达到高峰。此外,高温和低温均诱导HassAK基因的表达,说明该基因可能参与昆虫抵御外界不良环境。 %K 烟夜蛾 %K 精氨酸激酶 %K 基因克隆 %K 荧光定量PCR %K 表达谱分析 %U http://www.insect.org.cn/CN/abstract/abstract10897.shtml