%0 Journal Article %T 家蝇Denfensin-1基因的克隆、诱导表达及启动子活性分析 %A 卢丹 %A 郑立 %A 王欣欣 %A 王凡 %A 唐婷 %A 柳峰松 %J 昆虫学报 %P 854-863 %D 2013 %X 【目的】鉴定一种新的家蝇Muscadomestica防御素基因,并分析其功能。【方法】从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1。利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的表达模式,并且利用基因步移技术获得了启动子序列,同时采取细胞转染技术验证Mdde-1启动子活性。【结果】该序列包含一个276bp的开放阅读框,编码91个氨基酸残基。推导的氨基酸序列N端包括1个23个氨基酸残基的信号肽和1个28个氨基酸残基的前肽。成熟肽由40个氨基酸残基组成,含有1个典型的CSαβ基序。实时荧光定量PCR结果显示,家蝇2龄幼虫受金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus(G+)刺激后Mdde-1表达明显上调,而大肠杆菌Escherichiacoli(G-)刺激后表达下调;Mdde-1在家蝇幼虫受到热激时呈上调表达。为进一步研究其调控机制,克隆了Mdde-1启动子,并证明了该启动子具有活性。【结论】据此认为Mdde-1是一种新的家蝇防御素,并且在免疫革兰氏阳性菌方面发挥重要作用;同时我们首先证明了Mdde-1的启动子具有活性。本研究为进一步研究家蝇防御素的作用机制奠定了基础。 %K 家蝇 %K 先天免疫 %K 抗菌肽 %K 防御素 %K 基因克隆 %K 启动子 %U http://www.insect.org.cn/CN/abstract/abstract13755.shtml