%0 Journal Article %T 粉尘螨Ⅰ类变应原(DerfⅠ)的克隆表达、纯化及免疫学特性 %A 朱健琦 %A 刘志刚 %A 高波 %A 吉坤美 %A 邢苗 %J 昆虫学报 %P 213-218 %D 2006 %X 粉尘螨Ⅰ类变应原(DerfⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上,得到重组质粒pET24a-DerfⅠ,工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出DerfⅠ蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot及ELISA方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。 %K 粉尘螨 %K 变应原 %K 表达 %K 纯化 %K 特性鉴定 %U http://www.insect.org.cn/CN/abstract/abstract8552.shtml