%0 Journal Article %T 粘虫中肠α-淀粉酶活性测定方法的参数优化 %A 孔玉萍 %A 黄青春 %A 刘曼慧 %A 丰俊 %A 刘扬 %J 昆虫学报 %P 981-988 %D 2007 %X 针对粘虫Mythimnaseparata中肠α-淀粉酶筛选了11种不同参数组合的3,5-二硝基水杨酸活性测定方法,并对其中最适组合的各个参数进行了优化。结果表明:在离体测定条件下,粘虫中肠α-淀粉酶活性的最优化测定参数为0.03mol/L磷酸盐缓冲液(pH8.0,含有55mmol/LNaCl)、温度45℃、吸收波长480nm。Ca2+对α-淀粉酶活性具有抑制作用。该优化法能够显著降低粘虫、德国小蠊Blattellagermanica、黄粉虫Tenebriomolitor、淡色库蚊Culexpipienspallens和家蝇Muscadomestica等昆虫α-淀粉酶的米氏常数Km值,且粘虫和德国小蠊α-淀粉酶的Vmax值增大,但黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的Vmax值均明显减小。结果说明,在该优化体系下,粘虫α-淀粉酶与底物的亲和力增强,最大反应速度增大,测定酶活性的准确性和灵敏度显著提高;同时该优化体系也可作为测定德国小蠊α-淀粉酶活性的优化方法,但不适合作为黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的最优化测定方法。 %K 粘虫 %K α-淀粉酶 %K 参数优化 %K 动力学常数 %U http://www.insect.org.cn/CN/abstract/abstract9714.shtml