%0 Journal Article %T 家蚕溶茧酶基因的真核表达及其产物的生物活性检测 %A 吴玉丹 %A 李 %A 兵 %A 王文兵 %A 王 %A 东 %A 沈卫德 %J 昆虫学报 %P 466-472 %D 2008 %X 为了研究家蚕Bombyxmori溶茧酶基因(cocoonae)真核表达及其产物的生物活性,将溶茧酶基因(GenBank登录号EF428980)克隆至杆状病毒转移载体pFastBacTM1中获得pFast-cocoonase,将其转化DH10Bac感受态细胞后,PCR方法检测证实所分离的重组病毒DNA中含有目的片段溶茧酶基因。用脂质体法转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒。SDS-PAGE分析显示,感染重组杆状病毒Bac-cocoonase的细胞表达产物在约为27.6kD处出现特异性条带,这与预测的蛋白大小相符。用该表达产物与茧丝反应后,电镜下观察茧丝的形态,结果表明表达产物对茧丝的丝胶层有一定的水解作用。 %K 家蚕 %K 溶茧酶基因 %K 真核表达 %K 杆状病毒系统 %K Bac-to-Bac %K 系统 %U http://www.insect.org.cn/CN/abstract/abstract9590.shtml