%0 Journal Article
%T 产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶基因的克隆与原核表达
%A 宋占科
%A 王小艳
%A 陈国强
%A 李春
%J 化工学报
%P 3101-3106
%D 2008
%X 产紫青霉（PenicilliumpurpurogenumLi-3）β-葡萄糖醛酸苷酶可定向转化甘草酸生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸。根据β-葡萄糖醛酸苷酶氨基酸序列的同源保守区设计简并引物，PCR扩增克隆得到β-葡萄糖醛酸苷酶编码基因pgus(GenBank登录号：EU095019)，该基因全长1815bp，编码604个氨基酸，理论单亚基分子量为67.77×103，含有4个潜在的N-糖基化位点。构建原核表达载体pET-28a(+)-pgus，转化大肠杆菌BL21（DE3），获得高效表达pgus基因的重组菌。经IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析柱纯化的重组酶PGUS-E，纯度达到95%以上，得率为25.6mg•L-1，SDS-PAGE分析检测分子量约为70×103，比酶活达到6368U•mg-1。
%U http://www.hgxb.com.cn/CN/abstract/abstract9368.shtml