%0 Journal Article
%T 定点突变提高细胞色素P450BM-3吲哚羟基化能力
%A 张彭湃
%A 胡升
%A 黄俊
%A 梅乐和
%A 雷引林
%A 金志华
%A 姚善泾
%J 化工学报
%P 3331-3337
%D 2013
%R 10.3969/j.issn.0438-1157.2013.09.035
%X 为进一步提高细胞色素P450BM-3(A74G/F87V/L188Q)对吲哚的羟基化能力,根据酶结构与功能的关系,以突变酶E435T为基础,在168位点引入D168L突变,获得了吲哚羟基化能力得到显著提高的突变酶D168L/E435T。突变酶对吲哚的Km为1.72mmol·L-1(父本2.09mmol·L-1),转化数(kcat)为28.15min-1(父本4.04min-1),表明D168L定点突变可以略微提高酶对底物的亲和力,但主要的效应是促进了底物的转化速率,这两个效应的综合表现是使酶的催化效率(kcatKm-1)比父本酶提高了8.48倍。此外,产物中副产物靛玉红的比例也降低为1.2%(父本7.3%),这说明该突变酶催化吲哚的区域选择性上也更有利于靛蓝的生成。
%K 细胞色素P450
%K BM-3
%K 定点突变
%K 羟基化
%K 吲哚
%K 靛蓝
%U http://www.hgxb.com.cn/CN/abstract/abstract14887.shtml