%0 Journal Article
%T 重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征
%A 李贵龙
%A 王靖
%A 刘昌胜
%J 化工学报
%P 3183-3188
%D 2015
%R 10.11949/j.issn.0438-1157.20150825
%X 骨形态发生蛋白-2(BMP-2)是重要的骨诱导生长因子,是提高骨修复材料活性和临床骨修复效果的有效手段和关键物质。由于BMP-2在体内含量低,依靠从动物体内提取难以满足临床需求。本文研究满足临床需求的BMP-2的制备方法,并评价其生物活性。采用密码子优化方法,并通过进一步更换其中部分核苷酸编码,得到优化的hBMP-2基因的DNA序列,制备大肠杆菌rhBMP-2菌株,通过发酵及工艺优化,获得BMP包涵体,经分离纯化与复性,制备出高纯度的rhBMP-2。测定C2C12细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性来表征单倍体和二倍体BMP-2的成骨活性,发现二倍体rhBMP-2的成骨活性明显高于单倍体rhBMP-2,并且随着BMP-2浓度增加,碱性磷酸酶活性上升。体内动物异位成骨实验发现rhBMP-2肌带植入小鼠体内3周后,取出的异位骨颗粒鲜艳饱满,骨结构完整;HE切片和Masson三色切片都显示出良好的异位成骨效果。此方法制备的rhBMP-2具有良好的诱导成骨分化能力,可用于骨组织修复,满足临床需要。
%K 骨修复
%K 生物医学工程
%K 蛋白质
%K 蛋白质复性
%K 骨形态发生蛋白-2
%K 原核表达
%U http://www.hgxb.com.cn/CN/abstract/abstract17506.shtml