%0 Journal Article
%T TMV、PVM和CMV干扰载体构建及对人参果遗传转化
%A 高宜峰
%A 张菲菲
%A 张金文
%A 陆艳梅
%A 魏桂民
%A 马廷蕊
%J 核农学报
%P 44-51
%D 2014
%R 10:11869/j.issn.100-8551.2014.01.0044
%X 人参果是以营养器官繁殖为主的多年生草本植物，连年种植易造成多种病毒病积累。为了寻求一种能同时抵御多种病毒病的方法，本试验以危害人参果的3种主要病毒为研究对象，根据GenBank中烟草花叶病毒（TMV）P126基因、马铃薯M病毒（PVM）CP基因和黄瓜花叶病毒（CMV）2b蛋白基因序列，利用E-RNAi网站提供的分析软件，筛选出含有较多有效小干扰RNA[siRNA，19nt]的长dsRNA（LongdsRNA）片段作为RNAi的靶序列。用重叠延伸PCR方法将三个靶标片段融合在一起，构建了一种具有内含子（intro）的反向重复结构和嵌合基因的植物RNAi表达载体pCEIHFR。将pCEIHFR通过冻融法导入农杆菌LBA4404并转化人参果，经过草甘膦筛选和PCR检测，确认其中的24株为转基因阳性植株。
%K 烟草花叶病毒
%K 马铃薯M病毒
%K 黄瓜花叶病毒
%K ihpRNA
%K 转基因人参果
%U http://www.hnxb.org/CN/abstract/abstract11285.shtml