%0 Journal Article
%T 药用菊花SCoT-PCR反应体系的正交优化
%A 何仁锋
%A 冯尚国
%A 陈喆
%A 高岭
%A 沈晓霞
%A 沈宇峰
%A 王志安
%A 王慧中
%J 核农学报
%P 1781-1789
%D 2014
%R 10.11869/j.issn.100-8551.2014.10.1781
%X 为进一步开发利用药用菊花种质资源,为药用菊花的遗传多样性及分子鉴定研究提供技术支持,建立并优化药用菊花的目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)体系,在方差分析基础上,运用L25(56)正交设计在5个水平上对影响药用菊花SCoT-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物5个因素进行优化试验,并对PCR结果进行分析.建立了药用菊花SCoT-PCR最佳反应体系(20μL):模板DNA10ng,引物0.8μmol·L-1,dNTPs0.2mmol·L-1,Mg2+2.0mmol·L-1,Taq酶1.5U,SCoT反应的影响因素依次为:Taq酶>引物>dNTPs>Mg2+>模板DNA.优化的SCoT-PCR反应体系在多个药用菊花品种遗传多样性研究中得到了验证,结果表现出良好的稳定性、重复性和多态性丰富等特点,该体系的建立为药用菊花品种遗传多样性分析、系统发育研究、遗传图谱构建、基因定位和分子标记辅助育种研究奠定了基础.
%K 药用菊花
%K SCoT
%K 优化
%K 正交设计
%U http://www.hnxb.org/CN/abstract/abstract11522.shtml