%0 Journal Article
%T 高温胁迫下水稻灌浆初期籽粒的全长cDNA文库构建及其分析
%A 贺超
%A 肖小军
%A 章智
%A 彭琦
%A 黄英金
%A 廖江林
%J 核农学报
%P 1437-1443
%D -1
%R 10.11869/j.issn.100-8551.2015.08.1437
%X 为克隆水稻灌浆期耐热性相关基因的全长cDNA序列,本研究以水稻灌浆期耐热纯系XN0437T和热敏感纯系XN0437S为材料,于灌浆初期(扬花后第8天)进行38.0/33.0±0.5℃(白天/夜间)温度处理,设3次高温处理重复;高温处理结束时,取耐热和热敏感纯系籽粒提取总RNA,3次高温处理样品的总RNA等量混合后,利用SMART技术合成cDNA双链,经琼脂糖凝胶电泳分离后,分5个区段回收大小不同的cDNA,分别克隆到pGEM-TEasyVector载体,构建了5个全长cDNA亚文库并分析了这些亚文库的质量。结果表明:5个全长cDNA亚文库共获得7974个阳性克隆,平均插入片段大于1.0kb,整个文库的全长率约为75%;插入片段大于0.5kb的亚克隆文库的滴度均大于4.6×106pfu·mL-1、重组率大于98.1%±0.79%。为获得全长cDNA文库克隆目的基因的全长奠定了基础。
%K 水稻
%K 灌浆期
%K 籽粒
%K 高温胁迫
%K 全长cDNA文库
%U http://www.hnxb.org/CN/abstract/abstract11777.shtml