%0 Journal Article
%T 杨树ISSR反应体系的建立及正交设计优化
%A 汪结明
%A 项艳
%A 吴大强
%A 孙志娟
%A 蔡诚
%J 核农学报
%D 2007
%X 采用正交设计的方法,对杨树ISSR-PCR反应中5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物)在4个水平上进行优化试验。建立了适合杨树的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有1×buffer,0.12mmol/LdNTP,0.4μmol/L引物,3.5mmol/LMg2+,1.5UTaqDNA聚合酶和40ng模板DNA。对杨树ISSR-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验,发现引物W95142的最适退火温度为56.1℃,且最适退火温度因引物而异。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术进行杨树种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。
%K 杨树
%K ISSR
%K 正交设计
%K 反应体系
%K 优化
%U http://www.hnxb.org/CN/abstract/abstract8747.shtml