%0 Journal Article %T 新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究 %A 张丽 %A 甘晓燕 %A 石磊 %A 陈虞超 %A 聂峰杰 %A 宋玉霞 %J 草地学报 %P 359-365 %D 2014 %R 10.11733/j.issn.1007-0435.2014.02.023 %X 以新疆大叶苜蓿(Medicagosativa‘XinjiangDaye’)叶片作为转化受体,利用农杆菌介导法将从梭梭(Haloxylonammodendron)中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转化紫花苜蓿,研究选择剂卡那霉素对愈伤组织分化的影响,并采用正交试验设计优化了影响紫花苜蓿转化的4个主要因子,建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效转化体系,获得了转基因植株。结果表明卡那霉素在愈伤组织分化培养时的上限浓度以50mg·L-1为宜;转化过程中当浸染时间为5min,菌液浓度OD600为0.2,外植体预培养6d,共培养后清洗外植体的头孢雷素(Cef)浓度为800mg·L-1是最佳转化方案,抗性芽分化率达到65.5%;4个因子中菌液浓度对转化率影响最大,清洗外植体的Cef浓度和浸染时间影响次之,外植体预培养时间的影响最小。经PCR和RT-PCR检测,初步证明了BADH基因已经整合到紫花苜蓿中,转化率为16.0%。 %K 紫花苜蓿 %K 转化 %K 农杆菌 %K BADH基因 %K 转基因植株 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_cdxb/CN/abstract/abstract1937.shtml