%0 Journal Article
%T 结缕草SSR反应体系的正交优化(英文)
%A 桂金山
%A 王赟文
%A 方程
%J 草地学报
%D 2008
%R 10.11733/j.issn.1007-0435.2008.01.018
%X 为了快速获得结缕草(Zoysiajaponica)SSR反应体系,采用5因素(模板DNA,Mg2+,dNTP,Taq酶和引物)4水平正交设计筛选合适的结缕草SSR体系,并通过随机挑选3对Tm相近的引物对该优化体系进行验证。结果表明正交设计可应用于SSR-PCR反应体系的优化,20μl最佳PCR反应体系中包括2μl10×buffer、1.0UTaq酶、0.2mM引物、100ng模板DNA、0.2mMdNTP、2.0mMMg+;对结缕草进行梯度退火实验,其最佳退火温度为56-58℃;可行扩增程序是94℃预变性4min、进行35个循环的94℃变性30s、56-58℃退火40s,72℃延伸1min;72℃延伸10min,4℃保存;该最适反应体系的建立,为今后结缕草SSR分析奠定了坚实基础。
%K 结缕草
%K SSR标记
%K 反应体系
%K 正交设计
%K 优化
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_cdxb/CN/abstract/abstract721.shtml