%0 Journal Article
%T 基因打靶载体选择标记盒的构建及表达
%A 张磊
%A 陈刚
%A 孙怀昌
%J 扬州大学学报(农业与生命科学版)
%D 2002
%X ？？？？为构建山羊乳腺基因打靶载体的选择标记盒,将loxP位点分别引入正、反向引物,以含新霉素磷酸转移酶(neo)基因的质粒pTarget为模板,用高保真聚合酶链反应(PCR)扩增得loxPneoloxP选择标记盒。将PCR产物克隆到pGEMT载体后进行的序列分析结果显示,引入的loxP位点及扩增后的neo基因序列均是正确的。将此选择标记盒克隆到不含neo基因的真核表达载体ΔpTarget后转染COS1细胞,经过G418筛选获得药物抗性细胞克隆。再将此选择标记盒克隆到山羊β乳球蛋白基因打靶载体并转染山羊成纤维细胞,经过G418选择后也获得抗性细胞克隆。结果表明:克隆的loxPneoloxP选择标记盒可用于基因打靶载体的构建。
%K 基因打靶载体
%K 选择标记盒
%K 聚合酶链反应
%K 表达
%U http://zjzy.yzu.edu.cn/ydxb-detal.php?id=ny20020206