%0 Journal Article %T 马铃薯软腐病菌Erwiniacarotovorasubsp.carotovora714种胞外酶基因的克隆和原核表达分析 %A 李洋 %A 张俊莲 %A 白江平 %A 徐振峰 %A 王蒂 %J 草业科学 %P 561-574 %D 2014 %X ?以马铃薯软腐病菌Erwiniacarotovorasubsp.carotovora71(Ecc71)为材料,利用同源克隆技术克隆软腐病果胶酸盐裂解酶(pel)、多聚半乳糖醛酸酶(peh)、纤维素酶(cel)和蛋白酶(prt)基因,对其进行生物信息学分析,并将其克隆到原核表达载体pET28a中,将重组载体pET28a-pel、pET28a-peh、pET28a-cel和pET28a-prt转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定和酶活测定,得到了与理论推算的pel、peh、cel和prt基因表达产物分子质量相符的特异条带,并且其酶活性分别为1.672U·mL-1·h-1和0.024、112.7、16.95U·mL-1·min-1。这些结果为今后探究这4种酶之间的相互作用及马铃薯抗病性研究奠定了基础。 %K 马铃薯 %K 软腐病 %K 致病因子 %K 克隆 %K 原核表达 %U http://cykx.lzu.edu.cn/CN/abstract/abstract10498.shtml