%0 Journal Article
%T 欧美杨脱水素PdDHN2b的克隆与表达分析
%A 郭
%A 鹏
%A 邢
%A 鑫
%A 张万筠
%A 姜
%A 健
%J 北京林业大学学报
%P 22-28
%D 2015
%R 10.13332/j.cnki.jbfu.2015.01.017
%X 以欧美杨为材料,通过RT-PCR方法从欧美杨叶片中克隆到了抗旱脱水素DHN2b基因(命名为PdDHN2b),该基因开放阅读框为1440bp,编码379个氨基酸,绝大多数氨基酸组成属于亲水性氨基酸,无明显跨膜结构域。亚细胞定位表明PdDHN2b基因定位在细胞质或细胞膜上。荧光定量PCR分析表明:该基因在顶端中表达量最高,功能叶、根和茎中则无表达。同时该基因受NaCl、ABA和干旱等诱导表达。另外,构建了原核表达载体pET-PdDHN2b,并在大肠杆菌BL21中表达融合蛋白,诱导纯化后免疫小白鼠,制备抗体。SDS-PAGE电泳结果表明,融合蛋白分子量为58ku。最后利用Ni-NTA纯化的PdDHN2b-his重组蛋白用于Westernblot分析。
%K 欧美杨
%K PdDHN2b
%K 基因
%K 克隆
%K 表达
%K 逆境
%U http://j.bjfu.edu.cn/CN/abstract/abstract10099.shtml