%0 Journal Article %T 肝癌细胞分泌蛋白质的多种提取方法比较 %A 曹晶 %A 沈诚频 %A 张军 %A 姚鋆 %A 申华莉 %A 刘银坤 %A 陆豪杰 %A 杨芃原 %J 中国科学 生命科学 %P 853-858 %D 2010 %X 由于分泌蛋白在重大生理和病理过程中的重要角色和功能,使得分泌蛋白质组的研究备受人们关注.高效提取分泌蛋白质是分泌蛋白质组学研究的第一步,也是关键的一步.本研究首次比较了3种常用的提取方法:超滤法、沉淀法和透析法.以具有高自发性转移潜能的人肝癌细胞系LM3为研究对象,采用3种方法平行提取分泌蛋白,发现超滤法的提取效率最高;蛋白质经过溶液酶解,在线的一维反相高效液相色谱分离和ESI-MS/MS质谱鉴定,共鉴定了360个非冗余蛋白,其中有34,110和29个蛋白分别只在超滤法、沉淀法和透析法提取的样品中被鉴定到,沉淀法占优势,3种方法互相补充.360个蛋白中,有42个分泌蛋白为首次被鉴定到,扩大了已有的人肝癌转移细胞分泌蛋白数据库. %K 肝癌 %K 分泌蛋白 %K 蛋白提取 %K 超滤 %K 沉淀 %K 透析 %K LC-MS/MS %U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract500611.shtml