%0 Journal Article
%T 一种来源于脆弱类杆菌的α-半乳糖苷酶的理化性质及其酶解B型红细胞的工艺研究
%A 高红伟
%A 李素波
%A 鲍国强
%A 檀英霞
%A 王颖丽
%A 章扬培
%A 季守平
%A 宫锋
%J 中国科学 生命科学
%P 1030-1036
%D 2011
%R 10.1360/052011-607
%X 利用α-半乳糖苷酶去除红细胞表面的B抗原是制备通用O型红细胞的有效方法.本文在克隆表达纯化脆弱类杆菌来源的α-半乳糖苷酶的基础上对其理化性质进行了研究,该酶的分子量为64908Da,等电点在7.12~7.30之间,最适温度为41℃,最适pH为5.6~6.0,其理化性质适合用于B型红细胞的血型改造;为了确定高效、快速、温和的酶解条件,本文对酶解B型红细胞的工艺进行了优化.通过研究缓冲液对酶与红细胞结合的影响,确定了最佳酶解缓冲液为250mmol/L甘氨酸和3mmol/LNaCl,pH6.8;酶解的最适红细胞压积为40%,酶解温度为26℃,酶解时间为1h.利用优化的酶解工艺获得的B-ECORBCs形态及结构功能指标均正常,流式细胞结果证明其B抗原和H抗原标记率与O型红细胞相当,说明制备B-ECORBCs的工艺已成熟.这种工艺具有酶用量少、酶解条件温和、制备过程简单和时间短等优势,具有很好的临床应用前景.
%K 基因重组α-半乳糖苷酶
%K 脆弱类杆菌
%K 理化性质
%K 血型改造
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract505004.shtml