%0 Journal Article %T 通过染色体整合表达古菌乙酰化酶合成N-末端乙酰化胸腺肽β4 %A 曹赛 %A 戴红梅 %A 孙旭 %A 颛孙丹丹 %A 和金周 %A 司信喜 %A 李树龙 %A 方宏清 %A 陈惠鹏 %A 谢达平 %A 周长林 %J 中国科学 生命科学 %P 1008-1015 %D 2011 %R 10.1360/052011-565 %X 胸腺肽β4(Tβ4)是N-末端乙酰化的43肽,具有多种重要生物学功能.其生物合成存在两大难点,即乙酰化修饰和小分子肽的表达.本研究发现来自古菌Sulfolobussolfataricus的乙酰化酶ssArd1可以催化Tβ4的N-末端乙酰化修饰.利用Red同源重组技术将ssArd1基因表达盒整合至E.coliBL21(DE3)染色体的lpxM位点上,构建了可以实现Tβ4N-末端乙酰化修饰的新型宿主E.coliBDA.将Tβ4编码基因融合在改造的微型SplDnaXIntein的N端,并在Intein的C端添加His标签,构建了表达载体pET-Tβ4-Intein.在E.coliBDA中表达的融合蛋白,经镍亲和层析纯化后用β-巯基乙醇诱导融合蛋白切割释放小分子多肽,获得了具有N-末端乙酰化的Tβ4. %K 胸腺肽β4 %K 乙酰化酶 %K N-末端乙酰化 %K Intein %U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract505001.shtml