%0 Journal Article
%T 组织特异RNAi转基因小鼠模型的构建
%A 代蓉
%A 沈思军
%A 甘尚权
%A 毛青青
%A 万鹏程
%A 郭洪
%A 孟庆勇
%A 刘守仁
%J 中国科学 生命科学
%P 289-295
%D 2011
%R 10.1360/052011-100
%X RNAi是一种行之有效的基因沉默的新方法,被广泛地应用于基因功能的研究、疾病的治疗以及新型疫苗的研制等领域.本研究通过原核显微注射干扰载体的方法制备转基因小鼠.选用皮肤组织特异表达的人源角蛋白14(K14)基因启动子(2000bp)作为表达载体启动子,成功地驱动融合表达载体EGFP-shRNA进行干扰片段前体的转录,进而生成成熟的干扰片段,靶向小鼠BMP4基因使其发生沉默.所得到的转基因小鼠及其杂交后代经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明外源基因准确无误地整合到小鼠基因组.Northern杂交结果证明,小干扰RNA在皮肤组织中有较高水平的表达,在肺和肠组织中有较低水平的表达.研究结果表明,利用PolⅡ型(K14)启动子驱动shRNA融合转录本的表达,在特定组织高表达siRNA,从而达到抑制特定组织目的基因表达的技术路线是可行的.同时为利用K14启动子进行毛囊相关基因干扰研究积累了基础数据,为制备组织特异抑制基因表达的转基因大家畜提供了一个参考方法.
%K 组织特异
%K RNAi
%K 转基因小鼠模型
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract503170.shtml