%0 Journal Article
%T 链间二硫键改善FⅧ基因断裂转移小鼠血浆重链分泌和凝血活性
%A 朱甫祥
%A 刘泽隆
%A 缪静
%A 屈慧鸽
%A 迟晓艳
%J 中国科学 生命科学
%P 538-543
%D 2012
%X 体外细胞培养实验证明,双载体共转重链A2结构域Met662和轻链A3结构域Asp1828突变为Cys的B区缺失型凝血Ⅷ因子(BDD-FⅧ)基因可使共表达的重、轻链形成链间二硫键,重链的分泌水平得到改善.本文进一步观察小鼠体内双载体转此突变体BDD-FⅧ基因后血浆中重链的分泌量和凝血活性.构建一对含Cys662突变重链和Cys1828突变轻链真核表达载体,经门静脉注射双表达载体至C57BL/6小鼠体内,用ELISA法和Coatest法分别检测小鼠血浆中重链的分泌量和凝血活性为(239±56)ng/mL和(1.09±0.25)IU/mL,明显高于双载体共转野生型BDD-FⅧ基因对照小鼠((84±25)ng/mL和(0.36±0.12)IU/mL).结果表明,链间二硫键形成可有效增强转基因小鼠的血浆重链分泌,提高血浆凝血活性，改善双载体转BDD-FⅧ基因功效,为后续应用双AAV载体的血友病基因治疗研究提供实验依据.
%K 凝血Ⅷ因子
%K 双载体转基因
%K 链间二硫键
%K 重链分泌凝血活性
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract508123.shtml