%0 Journal Article %T 假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究 %A 李忠玉 %A 黄秋林 %A 粟盛梅 %A 周洲 %A 陈超群 %A 钟光明 %A 吴移谋 %J 中国科学 生命科学 %P 64-70 %D 2012 %X 包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用.为确定假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征,本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增Ct440基因,克隆入pGEX-6p原核表达载体构建pGEX-6p/Ct440原核表达重组体,重组体转化到XL1-blue大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT440.纯化后的CT440融合蛋白免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(IFA)和Westernblot测定抗体的特异性.特异性抗体用于分析CT440蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响.结果表明,CT440蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上,为沙眼衣原体包涵体膜蛋白;该蛋白在衣原体感染12h后开始表达,直至持续到整个感染周期;转基因在胞浆表达的CT440融合蛋白不影响其后的衣原体感染.本实验为深入研究衣原体与宿主细胞间的相互作用,阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据. %K 沙眼衣原体 %K CT440 %K 包涵体膜蛋白 %U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract506346.shtml