%0 Journal Article
%T U6嵌合型抗caspase-3核酶的体外及体内活性鉴定
%A 徐人欢
%A 刘静
%A 徐丰
%A 江舸
%A 谢青
%A 周霞秋
%A 金由辛
%A 王德宝
%J 中国科学 生命科学
%P 353-359
%D 2001
%X 为探讨caspase-3基因在细胞凋亡中的作用,及不同表达核酶的载体在体内的表达效果,本研究对比了3种表达核酶的真核质粒,包括RNA聚合酶Ⅱ启动的p1.5RZ107(自我剪切)和pRZ107及RNA聚合酶Ⅲ启动的嵌合于U6中的pU6RZ107在体外和在肝细胞BRL-3A内的活性,以期获得细胞内切割活性较高的的核酶载体方面的信息.结果显示,具有自我剪切功能的质粒p1.5RZ107在体外切割靶RNA的效率最高,几达80%;而体内caspase-3在RNA,蛋白水平及蛋白功能活性上均显著下降,证明核酶在体内均可有效地表达并切割底物,以pU6RZ107切割效率最高,约达65%,pRZ107次之,p1.5RZ107最低.结果表明,U6嵌合型核酶pU6RZ107体内可有效地表达核酶及下调靶RNA水平,这不仅为探讨caspase-3在凋亡途径中的作用,也可为今后的基因治疗提供研究基础.
%K caspase-3
%K 转录
%K 切割反应
%K 转染
%K BRL-3A细胞
%K 核酶
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract402056.shtml