%0 Journal Article %T U6嵌合型抗caspase-3核酶的体外及体内活性鉴定 %A 徐人欢 %A 刘静 %A 徐丰 %A 江舸 %A 谢青 %A 周霞秋 %A 金由辛 %A 王德宝 %J 中国科学 生命科学 %P 353-359 %D 2001 %X 为探讨caspase-3基因在细胞凋亡中的作用,及不同表达核酶的载体在体内的表达效果,本研究对比了3种表达核酶的真核质粒,包括RNA聚合酶Ⅱ启动的p1.5RZ107(自我剪切)和pRZ107及RNA聚合酶Ⅲ启动的嵌合于U6中的pU6RZ107在体外和在肝细胞BRL-3A内的活性,以期获得细胞内切割活性较高的的核酶载体方面的信息.结果显示,具有自我剪切功能的质粒p1.5RZ107在体外切割靶RNA的效率最高,几达80%;而体内caspase-3在RNA,蛋白水平及蛋白功能活性上均显著下降,证明核酶在体内均可有效地表达并切割底物,以pU6RZ107切割效率最高,约达65%,pRZ107次之,p1.5RZ107最低.结果表明,U6嵌合型核酶pU6RZ107体内可有效地表达核酶及下调靶RNA水平,这不仅为探讨caspase-3在凋亡途径中的作用,也可为今后的基因治疗提供研究基础. %K caspase-3 %K 转录 %K 切割反应 %K 转染 %K BRL-3A细胞 %K 核酶 %U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract402056.shtml