%0 Journal Article
%T 黄瓜花叶病毒互补型载体可与CP转基因发生重组
%A 雷万里
%A 方荣祥
%A 张国华
%A 陈晓英
%A 张晓勤
%J 中国科学 生命科学
%P 97-105
%D 2001
%X 为了探讨利用黄瓜花叶病毒(CMV)作为表达载体的可行性,克隆了山东株(SD)CMVRNA3的全长cDNA,并测定了全序列.采用定点突变的方法在衣壳蛋白(CP)基因起始密码子处改造出一个NsiⅠ位点.以绿色荧光蛋白(GFP)基因置换SD-CMVRNA3cDNA的CP基因.将Fny株CMVRNA1,RNA2和嵌合SD-CMVRNA3的cDNA分别克隆在35S启动子和终止子之间构建成表达载体.在烟草原生质体中验证了该表达载体可以表达GFP.然后将其接种到表达SDCP的转基因烟草上,试图构建成一个互补型载体.接种10d后,18棵植株中,有5棵的接种叶和其中1棵的系统叶上可检测到表达的GFP.然而1个月后,所有接种植株中都检测不到GFP.通过RT-PCR及序列分析,证实在互补系统中CMV载体与CP转基因发生了重组.上述结果对这种CMV互补型载体的可行性提出了质疑,同时也揭示了转CMVCP基因抗病毒植物的生物安全性中存在的新的问题.
%K 互补型载体
%K CP转基因
%K 重组
%K 生物安全性
%K 黄瓜花叶病毒
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract402027.shtml