%0 Journal Article %T 登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点的研究 %A 赵卫 %A 范宝昌 %A 胡志君 %A 陈水平 %A 王鹏程 %A 苑锡同 %A 李晓萸 %A 于曼 %A 秦鄂德 %A 杨佩英 %J 中国科学 生命科学 %P 552-558 %D 2002 %X pDVWS501为含有登革2型病毒全长cDNA的质粒,可利用感染性转录体技术恢复为有活力的病毒MON501.将MON501注射乳鼠脑内可引发脑炎症状,其E蛋白的62,203位分别为Glu,Asn.采用OL-PCR方法把pDVWS501E62位氨基酸突变为Lys,得到质粒TB62;E203位氨基酸突变为Asp,得到质粒TB203.将pDVWS501,TB62和TB203酶切后体外转录得到全长登革2型病毒转录体,应用电穿孔技术转染BHK-21细胞,7天后收毒.RT-PCR证实有登革2型病毒存在,接种C6/36细胞,3~5d可使其产生典型病变.测定突变区域的序列,结果表明得到了恢复病毒MON501和E62,E203位点突变的重组病毒HFT62,HFT203.3株病毒均在其基因组5′端加“G”,3′端则与登革2型病毒野生株相同.分别将3株病毒稀释至105~102TCID50,经脑内途径注射1日龄乳鼠,发现与MON501相比,HFT62,HFT203在同一稀释度发病乳鼠的个数减少,发病时间延长且差异显著,表明E62,E203可能是登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点. %K 毒力相关位点 %K 感染性转录体 %K 点突变 %K 登革2型病毒 %U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract402161.shtml