%0 Journal Article
%T EGFP标记柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗的构建及其在鸡体内的分布
%A 王秋悦
%A 任科研
%A 李建华
%A 张西臣
%A 宫鹏涛
%J 中国科学 生命科学
%P 1084-1089
%D 2008
%X 鸡球虫病给禽类养殖业带来重大经济影响.本实验利用DNA重组技术将柔嫩艾美尔球虫保护性抗原基因rhomboid和增强型绿色荧光蛋白EGFP基因串连,将其克隆到BCG中,构建EGFP标记柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗pMV361-Rho/EGFP.将rBCG口服免疫6日龄雏鸡,一周后剖杀,取肝、脾、肺、肾、盲肠各组织器官制作冰冻切片,激光共聚焦显微镜观察各组织器官rhomboid表达情况.另分别于免疫后7,14,21,28天提取肝、脾、肺、肾、盲肠各组织器官总RNA,实时定量RT-PCR方法检测rhomboid目的基因转录情况,比较各时期组织器官rhomboid基因表达量.结果显示,免疫一周后,用激光共聚焦显微镜观察到在肝、脾、肺、肾、盲肠各组织器官中均有EGFP表达.实时定量RT-PCR结果显示,免疫14天后rhomboid基因表达量达到高峰,随后开始下降,至28天后消失.本研究为重组卡介苗疫苗作为抗球虫疫苗的研究奠定基础.
%K 球虫病
%K rBCG
%K EGFP
%K rhomboid基因
%K 激光共聚焦显微镜
%K 实时定量RT-PCR
%U http://life.scichina.com:8082/sciC/CN/abstract/abstract410744.shtml