%0 Journal Article %T 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂20的表达特征分析 %A 张学义 %A 于皓 %A 张小娟 %A 朱保建 %A 魏国清钱 %A 岑刘朝良 %A 王磊 %J 应用昆虫学报 %D 2015 %X 【目的】原核表达家蚕bombyxmori丝氨酸蛋白酶抑制剂20(serineproteinaseinhibitor20,bmserpin-20),分析bmserpin-20基因和蛋白组织表达分布特点,以及不同外源病原物刺激家蚕后bmserpin-20基因的表达模式。【方法】利用pet-28a表达载体在大肠杆菌transetta(de3)中融合表达bmserpin-20蛋白,利用纯化的重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用实时定量pcr技术及westernblot方法分别分析bmserpin-20基因和蛋白的组织表达水平,以及病原物免疫刺激后的表达模式。【结果】在大肠杆菌中正确表达和纯化了融合bmserpin-20蛋白,并制备了多克隆抗体;bmserpin-20基因和蛋白在脂肪体、中肠、血细胞、马氏管、表皮、睾丸、卵巢中均有表达,且在表皮中表达量最高;家蚕5龄幼虫经核型多角体病毒(nuclearpolyhedrosisviruses)、藤黄微球菌micrococcusluteus、大肠杆菌escherichiacoli、白僵菌beauveriabassiana处理后,bmserpin-20基因表达量先下调而后上调,但不同病原物在不同时间的影响不尽相同。【结论】研究了bmserpin-20基因和蛋白的表达模式,为下一步研究其在家蚕免疫系统中的作用奠定了基础。 %K 家蚕 %K 丝氨酸蛋白酶抑制剂 %K 诱导表达 %K 表达分析 %U http://www.ent-bull.com.cn/viewmulu.aspx?qi_id=1447&mid=45681&xuhao=20