%0 Journal Article %T 飞蝗羧酸酯酶基因lmcare25的体外重组表达 %A 王建新等 %J 应用昆虫学报 %D 2013 %X 羧酸酯酶(carboxylesterase,care)是一类在生物中广泛分布的多功能家族酶系,在昆虫抗药性形成机制中发挥重要作用。为探讨飞蝗locustamigratoria(meyen)羧酸酯酶基因lmcare25的生物学功能,本文采用荧光实时定量pcr技术进行研究,发现其在飞蝗成虫各组织部位均有表达,其中胃盲囊、翅和肌肉中表达量较低,中肠、马氏管和脂肪体表达量较高。本文尝试在大肠杆菌和昆虫细胞体外重组表达该酶,构建重组表达载体pet32a-lmcare25,sds-page结果显示,lmcare25可在大肠杆菌bl21(de3)和jm109中表达,蛋白分子量约为60kda,但为包涵体;将lmcare25基因插入真核表达载体pfastbachta中,借助bac-to-bac?体系获得重组bacmid,以sf9细胞系作为宿主细胞表达目的蛋白,western-blot检测结果显示,lmcare25获得可溶性表达。上述结果为进一步深入研究飞蝗羧酸酯酶家族功能提供了基础资料。 %K 飞蝗 %K 羧酸酯酶 %K real-timepcr %K 原核表达 %K 真核表达 %U http://www.ent-bull.com.cn/viewmulu.aspx?qi_id=1014&mid=30135&xuhao=13