%0 Journal Article %T PCR-RFLP y RAPD para la tipificaci車n de Leishmania neotropical PCR-RFLP and RAPD for typing neotropical Leishmania %A Ana Margarita Montalvo %A Lianet Monzote %A Jorge Fraga %A Iv車n Montano %J Biom谷dica %D 2008 %I Instituto Nacional de Salud %X Introducci車n. El an芍lisis de la longitud de los fragmentos de restricci車n del producto amplificado y el estudio del ADN polim車rfico amplificado al azar han demostrado ser herramientas 迆tiles para la tipificaci車n de Leishmania. Objetivos. Estudiar la utilidad de las t谷cnicas moleculares para la identificaci車n y tipificaci車n de cepas de referencia de Leishmania spp. del Nuevo Mundo y valorar su aplicabilidad a muestras cl赤nicas. Materiales y m谷todos. Se aplic車 PCR para amplificar el gen que codifica la ciste赤no-proteinasa B, y el an芍lisis de la longitud de los fragmentos de restricci車n del producto amplificado utilizando 芍cido desoxirribonucleico de 16 cepas de referencia de Latinoam谷rica y de muestras cl赤nicas de pacientes colombianos con leishmaniasis, y la t谷cnica del 芍cido desoxirribonucleico polim車rfico amplificado al azar utilizando ocho cepas de referencia. Se establecieron los patrones de bandas en cada caso. Resultados. Se obtuvo producto de amplificaci車n en la PCR para Leishmania braziliensis, L. peruviana, L. panamensis y L. guyanensis. Para el resto, no fue posible amplificar el gen con los cebadores utilizados. La restricci車n mostr車 un patr車n de bandas com迆n para L. peruviana, L. guyanensis y L. panamensis, mientras L. braziliensis, presentaba un perfil individual 迆nico. El an芍lisis de restricci車n del producto amplificado gener車 un patr車n de bandas similar en los cinco pacientes estudiados, que se correspond赤a con el patr車n generado por L. peruviana, L. guyanensis o L. panamensis. Mediante la amplificaci車n al azar se obtuvieron patrones de bandas reproducibles con todas las cepas estudiadas, que posibilitaron la diferenciaci車n. Se discuten las ventajas y limitaciones de ambos procederes. Conclusiones. El combinar ambas metodolog赤as resultar赤a 迆til para identificar especies de importancia m谷dica, tomando en cuenta sus ventajas y desventajas. Introduction. The analysis of the PCR-restriction fragment length polymorphism and random amplified polymorphic DNA have been useful tools for Leishmania identification. Objectives. Molecular procedures were demonstrated for identification and typing of reference strains of New World Leishmania and their applicability was validated for clinical samples. Materials and methods. DNA was extracted from 16 reference strains of Latin American Leishmania as well as from clinical samples of leishmaniasis patients. A sequence coding for cysteine proteinase B was amplified by PCR and subjected to restriction fragment length polymorphism analysis. The enzyme used was Taq1. For eight of the reference strains, the rando %K Leishmania %K leishmaniasis/diagn車stico %K reacci車n en cadena de la polimerasa %K polimorfismo de longitud del fragmento de restricci車n %U http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/66