%0 Journal Article
%T Comparaci車n de la eficiencia de extracci車n de 芍cidos nucleicos utilizando distintos kits comerciales y empleando la qPCR: Efecto de las sustancias inhibidoras Comparison of nucleic acid extraction efficiency using different commercial kits and qPCR: Effect of inhibitors
%A Hugo R. Poma
%A Carolina Davies
%A Dolores Guti谷rrez Cacciabue
%A Mar赤a C. Mora
%J Revista argentina de microbiologˋ-a
%D 2012
%I Asociaci車n Argentina de Microbiolog赤a
%X La detecci車n de secuencias espec赤ficas de 芍cidos nucleicos (AN) empleando PCR revolucion車 las ciencias biol車gicas y m谷dicas. La PCR en tiempo real (qPCR) incorpor車 la posibilidad de obtener resultados cuantitativos. Una etapa decisiva previa a la qPCR es la extracci車n de AN, en la que se pueden producir tanto la remoci車n como la extracci車n conjunta de sustancias inhibidoras de la reacci車n enzim芍tica, lo que afectar芍 la eficiencia de amplificaci車n. En el presente trabajo se realiz車 una comparaci車n entre los kits de extracci車n comerciales Qiagen, Invitrogen y Macherey-Nagel, utilizados para extraer ADN de Trypanosoma cruzi de sangre murina artificialmente infectada y ARN de PP7, bacteri車fago de Pseudomonas aeruginosa, sembrado en matrices acuosas, en presencia o ausencia de inhibidores. La eficiencia de recuperaci車n de AN en muestras sin inhibidores fue similar para los tres kits de extracci車n. El kit de Invitrogen fue el 迆nico que no se vio afectado por la presencia de inhibidores en las muestras. The detection of specific nucleic acid (NA) sequences by PCR has revolutionized the biological and medical sciences. Real-time PCR (qPCR) opened up the possibility of obtaining quantitative results. NA extraction is a decisive step prior to qPCR since it may produce either the removal or co-extraction of inhibitory substances of the enzymatic reaction, which in turn affects the amplification efficiency. In the present work we compared the commercial NA extraction kits from Qiagen, Invitrogen and Macherey-Nagel, which were used to extract DNA from mice blood artificially infected with Trypanosoma cruzi and PP7 RNA, Pseudomonas aeruginosa bacteriophage, in spiked aqueous matrices. NA recovery efficiency in samples without inhibitors was similar for the three extraction kits. However, the Invitrogen kit was the only one that remained unaffected in the presence of inhibitors in the samples.
%K 芍cidos nucleicos
%K Extracci車n
%K PCR en tiempo real
%K Inhibici車n
%K Eficiencia
%K Nucleic acids
%K Extraction
%K Real-time PCR
%K Inhibition
%K Efficiency
%U http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-75412012000300003