%0 Journal Article
%T Determinaci車n del umbral de detecci車n de Pseudococcus viburni (Hemiptera: Pseudococcidae) por PCR Determination of the detection threshold of Pseudococcus viburni (Hemiptera: Pseudococcidae) by PCR
%A Diana Vera
%A Silvina Garrido
%A Elizabet Aun
%A Jonatan Lago
%J Revista de la Sociedad Entomolˋ3gica Argentina
%D 2012
%I Sociedad Entomol車gica Argentina
%X La cochinilla harinosa de los frutales Pseudococcus viburni (Signoret) es una plaga cuarentenaria, presente en el Alto Valle de R赤o Negro y Neuqu谷n, Argentina. Su detecci車n durante la fiscalizaci車n aduanera, aun en los estados inmaduros, provoca rechazos de la fruta fresca argentina con destino a los mercados internacionales. Las t谷cnicas actuales de identificaci車n de pseudoc車ccidos y otros cocoideos implican la realizaci車n de preparados microsc車picos que requieren varios d赤as. Por esto, la disminuci車n de los tiempos de identificaci車n es importante sobre todo en las tareas de fiscalizaci車n. En este trabajo, se determin車 el umbral de detecci車n espec赤fica de P. viburni mediante PCR, como as赤 tambi谷n, la implementaci車n de un m谷todo r芍pido de extracci車n de ADN mediante DNAzolT. Insectos de diferentes estados de desarrollo (huevo, ninfas (tres estados ninfales) y adulto), conservados en etanol pro an芍lisis a -20 oC, provenientes de montes frutales del Alto Valle, Argentina, fueron procesados seg迆n el protocolo del fabricante y se logr車 obtener ADN de buena calidad y concentraci車n. Una al赤cuota del mismo fue utilizado como templado para una reacci車n de PCR usando primers espec赤ficos para P. viburni, registrados en bibliograf赤a y como control positivo ADN de P. viburni de colecci車n entomol車gica. Los primers utilizados y sus secuencias son A4 (5'-cccgcggccgttctctcttt-3') y A5 (5'-atatgttgtgcatagttgtgtgtgcgc-3'), dise ados por Beuning et al. (1999). La amplificaci車n gener車 una banda de peso molecular esperado de 650 pb. en gel de agarosa al 1.5% en todos los estadios, se determin車 como l赤mite de detecci車n el estado de huevo. Esta t谷cnica constituye una detecci車n espec赤fica de P. viburni en un lapso m芍ximo de 48 h. The obscure mealybug Pseudococcus viburni (Signoret) is a quarantine pest present in the Upper Valley of R赤o Negro and Neuqu谷n, Argentina. The detection of any growth stage of the mealybug in quarantine inspections often results in rejections of fresh fruit in countries where the fruit is exported. In this study the detection threshold of P. viburni was determined by PCR technique. The DNA extraction kit, DNAzolTM, was used as a fast DNA extraction method. By using the above extraction kit, good DNA quality and concentration was obtained from specimens of P. viburni of different developmental stages (including eggs, nymphs and adults) which were preserved in pro-analysis ethanol at -20oC following the manufacturer protocol. One aliquote of this DNA was used as a template in a PCR reaction using specific P. viburni primers recorded in the literature and
%K Cochinilla harinosa de los frutales
%K Control aduanero
%K Plaga cuarentenaria
%K Umbral de detecci車n PCR
%K Mealybug of the fruit
%K Quarantine inspection
%K Quarantine pest
%K Threshold PCR
%U http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0373-56802012000100015