%0 Journal Article
%T M¨¦todo f¨¢cil y confiable para te ir n¨²cleos en hongos del complejo Rhizoctonia Easy and reliable method for nuclei staining of Rhizoctonia complex fungi
%A Luis Cede£¿o
%J Bioagro
%D 2008
%I Decanato de Agronom¨ªa de la Universidad Centroccidental
%X En el complejo Rhizoctonia la morfolog¨ªa hifal y configuraci¨®n del septo permiten diferenciar los g¨¦neros, mientras que las especies pueden ser distinguidas por la condici¨®n nuclear y el grosor de hifas ¡°gu¨ªas¡± ¨® la morfometr¨ªa del teleomorfo. Para caracterizar las especies en uni, bi y multinucleadas se han desarrollado varios m¨¦todos de tinci¨®n nuclear con acridina naranja, azules de anilina y tripano, diamina fenil indol (DAPI), giemsa, hematoxilina, orceina y safranina O. Algunos de esos procedimientos son r¨¢pidos, pero otros requieren t¨¦cnicas especiales (fluorescencia) o consumen mucho tiempo y limitan la cantidad de muestras a procesar. Un nuevo m¨¦todo fue desarrollado durante an¨¢lisis de anastomosis (AGs) en aislamientos de R. solani que atacan la papa cultivada en M¨¦rida, Venezuela. El procedimiento es r¨¢pido, f¨¢cil, confiable y permite la manipulaci¨®n simult¨¢nea de un n¨²mero considerable de especimenes, y tanto el n¨²cleo como el nucl¨¦olo conservan su integridad. El m¨¦todo fue probado exitosamente en 10 patrones de AGs de R. solani, y permiti¨® separar 173 cepas multinucleadas y 3 binucleadas, todas del g¨¦nero Rhizoctonia. El m¨¦todo fue efectivo utilizando sustrato de agua-agar 2,4 % m¨¢s PDA 0,39 %, en cultivos de 18 a 48 h fijado con formaldeh¨ªdo 4 % y coloreado con fucsina ¨¢cida 0,025 en ¨¢cido l¨¢ctico 50 %. Hyphal morphology and septal structure configuration of the fungi included in Rhizoctonia complex allows for differentiation of genus, while species may be distinguished by nuclear condition and thickness of the runner hyphae, or teleomorph morphometry. For characterization of species in uni, bi, and multinucleate diverse methods of staining have been developed using acridine orange, aniline and trypan blue, diamine phenyl indole (DAPI), giemsa, hematoxiline, orcein and saphranin O. Some of these procedures are quick to perform, while others require special techniques (fluorescence) or are time consuming, which impose a limit on the number of samples that can be processed at a time. A new method of nuclei staining was developed during the analysis of anastomosis groups (AGs) of R. solani strains isolated from potato plants cultivated in M¨¦rida, Venezuela. The procedure is quick, easy, and reliable, and allows for simultaneous manipulation of a significant number of samples, and both nucleus and nucleolus maintain their integrity. The method was successfully assayed in 10 different AGs testers of R. solani, and allowed separation of 173 multinucleate and 3 binucleate Rhizoctonia strains. Method effectiveness depends upon growth medium (water
%K Micolog¨ªa
%K tinci¨®n
%K morfolog¨ªa hifal
%K papa
%K Mycology
%K staining
%K hyphal morphology
%K potato
%U http://wwww.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1316-33612008000300009