%0 Journal Article
%T 结球甘蓝γ-生育酚甲基转移酶cDNA的克隆、分析及其异源表达酶蛋白的功能研究
%A 欧阳青
%A 樊春涛
%A 孙卉
%A 张玉满
%A 白双义
%A 蔡文启
%J 自然科学进展
%D 2003
%I 
%X 采用3′-和5′-RACE技术,从结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)幼苗顶芽中克隆了γ-生育酚甲基转移酶的全长cDNA序列(BoTMT).该cDNA长1265bp,包含一个1044bp的开放阅读框,编码包括叶绿体导肽和两个S-腺苷甲硫氨酸结合结构域(SAM-binding domain)在内的347个氨基酸组成的蛋白质.序列分析表明该蛋白质与目前已知的γ-生育酚甲基转移酶有41.8%～86.5%的同源性.半定量RT-PCR结果显示BoTMT主要在结球甘蓝的花和叶器官中表达.将BoTMT的成熟蛋白编码区序列克隆至原核表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达产物占菌体总蛋白的22%.体外酶活性测定结果表明表达的蛋白质具有γ-生育酚甲基转移酶活性,能有效地催化γ-生育酚甲基化生成α-生育酚.
%K 结球甘蓝
%K γ-生育酚甲基转移酶
%K 基因及原核表达
%K 体外酶促反应
%K 生育酚
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=01BA20E8BA813E1908F3698710BBFEFEE816345F465FEBA5&cid=96E6E851B5104576C2DD9FC1FBCB69EF&jid=504AF8C1E5476CA7C4EC9DF6FEAC14AC&aid=9AD10543C2B606A1&yid=D43C4A19B2EE3C0A&vid=FC0714F8D2EB605D&iid=DF92D298D3FF1E6E&sid=6452E1221020E61F&eid=EB8E83807F36F05B&journal_id=1002-008X&journal_name=自然科学进展&referenced_num=5&reference_num=15